人CDC2基因的克隆和原核表达及鉴定

• 作者: 徐波 费邵阳 郑永晨
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 人细胞分裂周期基因2 基因克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 834-836
• 页数: 3页
• 分类号: Q784
• 字数: 2184字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-587X.2007.05.015

摘要

目的:从人肝癌组织中克隆出人细胞分裂周期基因2( CDC2),并在大肠杆菌中表达CDC2蛋白.方法:从人肝癌组织中提取RNA,采用RT-PCR法扩增CDC2 cDNA,用DNA凝胶回收试剂盒纯化并回收RT-PCR产物,将RT-PCR产物插入pET28a(+)载体NdeⅠ和 XhoⅠ两酶切位点之间,转化大肠杆菌BL21(DE3);IPTG诱导表达人CDC2蛋白.结果:RT-PCR扩增出约894 bp的DNA片段,与GenBank中的CDC2基因序列完全一致.经限制性内切图谱和测序鉴定,成功构建了pET28a(+)/CDC2原核表达载体.SDS-PAGE分析结果显示人CDC2蛋白在大肠杆菌中得已表达.结论:从人肝癌组织中成功地扩增出CDC2基因,并在大肠杆菌中表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑永晨	吉林大学第二医院中心实验室	51	254	9.0	12.0
2	徐波	吉林大学第二医院中心实验室	21	206	8.0	14.0
3	费邵阳	吉林省第三人民医院神经外科	1	3	1.0	1.0