大鼠pEGFP-N1-PLZF真核表达载体的构建和意义

• 作者: 叶哲伟 夏伟 曾甫清 王振迪 白杨
• 来源期刊: 中国男科学杂志
• 学科: 军事
• 关键词: PLZF 基因表达 绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2007,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 6-8,13
• 页数: 4页
• 分类号: E321.1
• 字数: 2683字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0848.2007.08.002

摘要

目的 构建真核表达载体pEGFP-N1-PLZF,为基因水平研究早幼粒细胞白血病锌指蛋白(PLZF)在精原干细胞增殖和分化中的调控机制提供理论参考.方法 参考分子克隆技术,采用RT-PCR的方法从大鼠睾丸组织中扩增PLZF,将该基因连接克隆到含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的真核表达载体pEGFP-N1上,以构建重组质粒pEGFP-N1-PLZF.结果 实验从大鼠睾丸组织中提取总RNA,以RT-PCR方法获取编码PLZF基因的全序列cDNA.构建PLZF的c DNA真核表达质粒时将能发出绿色荧光的EGFP报告基因融合在PLZF基因,并经酶切后DNA电泳鉴定及DNA测序证实结果.结论 构建重组质粒pEGFP-N1-PLZF成功,实验中将能发出绿色荧光的EGFP报告基因融合在PLZF基因的3'端.提高PLZF在真核细胞中的表达,而且不影响其目的 蛋白的结构和功能,对研究PLZF调控精原干细胞增殖和分化机制具有重要的意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王振迪	华中科技大学同济医学院协和医院泌尿外科	23	48	4.0	6.0
2	曾甫清	华中科技大学同济医学院协和医院泌尿外科	253	1463	17.0	24.0
3	叶哲伟	华中科技大学同济医学院协和医院骨科	94	434	10.0	17.0
4	夏伟	华中科技大学同济医学院协和医院泌尿外科	18	83	5.0	8.0
5	白杨	华中科技大学同济医学院协和医院泌尿外科	28	79	5.0	8.0