慢病毒载体介导绿色荧光蛋白基因在小鼠T淋巴细胞中的表达

• 作者: 何徐彭 孙海英 徐开林 李德鹏 李振宇 潘秀英 高飞 鹿群先
• 来源期刊: 中国实验血液学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 慢病毒载体 T淋巴细胞 绿色荧光蛋白基因
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 免疫血液学
• 页码范围: 125-128
• 页数: 4页
• 分类号: Q7
• 字数: 2923字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-2137.2007.01.029

摘要

本研究构建含绿色荧光蛋白基因的慢病毒载体三质粒系统,并观察其在小鼠T淋巴细胞中的表达情况.应用亚克隆技术将多聚嘌呤通道(PPT)元件、泛醌启动子(PUB)和绿色荧光蛋白基因(GFP)连接至pLO134载体,构建成pTK153载体.之后应用磷酸钙沉淀法将慢病毒载体三质粒系统(包括包装质粒△NRF、转移质粒pTK153和包膜蛋白质粒VSV-G)共转染293T细胞,12小时后在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达情况,72小时收集病毒上清并感染小鼠T淋巴细胞,在荧光显微镜下和应用流式细胞仪(FACS)观察感染情况.结果表明:慢病毒载体的三质粒系统转染293T细胞12小时后在荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白表达,FACS分析转染效率为(63.04±7.24)%,病毒滴度测定为(3.09±0.61)×106U/ml.感染小鼠T淋巴细胞后,荧光显微镜下观察到GFP的表达,FACS分析转导效率为(37.98±6.26)%.结论:成功构建了含绿色荧光蛋白基因的慢病毒载体,对小鼠T淋巴细胞有较高的感染效率.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何徐彭	徐州医学院附属医院血液科	39	188	7.0	12.0
2	李德鹏	徐州医学院附属医院血液科	42	195	8.0	12.0
3	潘秀英	徐州医学院附属医院血液科	123	539	10.0	18.0
4	鹿群先	徐州医学院附属医院血液科	68	283	8.0	13.0
5	孙海英	徐州医学院附属医院血液科	40	167	6.0	11.0
6	李振宇	徐州医学院附属医院血液科	88	507	11.0	18.0
7	徐开林	徐州医学院附属医院血液科	207	750	11.0	19.0
8	高飞	徐州医学院附属医院血液科	5	32	2.0	5.0