GFP-HPVl8 E2删除突变体融合蛋白真核表达载体的构建与鉴定

• 作者: 万艳平 余敏君 尹卫国 彭俊 朱翠明 陈春莲
• 来源期刊: 南华大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 人乳头瘤病毒 E2基因 绿色荧光蛋白 真核表达
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 基础论著
• 页码范围: 643-645
• 页数: 3页
• 分类号: R373
• 字数: 2010字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1116.2007.05.002

摘要

目的 构建人乳头瘤病毒18型早期蛋白2(HPV18 E2)删除突变体N端(TAD)、C端(DBD)与增强型绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白的真核表达载体,为研究HPV18 E2基因与宫颈癌发生的关系提供实验基础.方法 用PCR扩增HPV18 E2 TAD、DBD基因序列,用EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切pEGFP-Cl载体与TAD、DBD基因PCR产物,纯化回收后,用连接酶连接并转化大肠杆菌JM109,筛选阳性克隆,并对其进行双酶切和测序鉴定.结果 阳性克隆质粒经双酶切后,琼脂糖凝胶电泳可见4.7 kb、618 bp和243 bp附近的片段.DNA测序结果经与GenBank登录的序列做BLAST分析,显示重组质粒分别含有618 bp与243 bp的目的基因片段,无碱基错配和移码突变,读码框完全正确.结论 成功地构建了GFP-HPV18 E2删除突变体融合蛋白真核表达载体pEGFP-C1/TAD与pEGFP-C1/DBD.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余敏君	南华大学病原生物学研究所	104	491	11.0	17.0
2	朱翠明	南华大学病原生物学研究所	61	211	7.0	10.0
3	万艳平	南华大学病原生物学研究所	157	780	13.0	20.0
4	彭俊	南华大学病原生物学研究所	21	108	5.0	9.0
5	尹卫国	南华大学病原生物学研究所	28	191	7.0	13.0