家蚕G蛋白γ1亚基(BmGγ1)的克隆及其谷胱甘肽硫转移酶融合蛋白的表达与纯化

• 作者: 樊美珍 章玉萍 苗雪霞 蒋剑豪 赵云坡 黄勇平
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 农学
• 关键词: G蛋白 γ1-亚基 家蚕 克隆 基因表达
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 627-633
• 页数: 7页
• 分类号: S881.2|Q51
• 字数: 5128字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0257-4799.2008.04.009

摘要

异三元G蛋白是真核细胞感知外界信号后将信号传递到胞内的重要分子,参与生物体广泛的信号转导.为了研究家蚕体内G蛋白的生理功能及其作用机制,运用生物信息学方法预测了家蚕G蛋白γ1亚基(Gγ1)的序列,设计引物验证预测序列后,克隆了家蚕Gγ1的序列,再通过酶切克隆至表达载体pET-41b(+)后,导入E.coli BL21宿主菌中,经异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组谷胱甘肽硫转移酶(glutathione s-transferase,GST)融合蛋白,并亲和层析纯化表达产物.家蚕Gγ1重组GST融合蛋白经SDS-PAGE电泳和Western blot分析,在分子质量约36 kD处出现特异性蛋白条带,重组蛋白经GST亲和层析柱纯化后,得到了高纯度的融合蛋白,说明已经成功克隆到家蚕Gγ1基因,并在E.coli BL21中高效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	樊美珍	安徽农业大学林学与园林学院微生物防治重点实验室	196	3032	28.0	40.0
2	苗雪霞	中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所	24	405	11.0	20.0
3	黄勇平	中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所	35	832	14.0	28.0
4	章玉萍	安徽农业大学林学与园林学院微生物防治重点实验室	3	20	2.0	3.0
5	蒋剑豪	中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所	2	7	2.0	2.0
6	赵云坡	中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所	3	34	2.0	3.0