西尼罗Ⅰ型病毒亚克隆的构建及其鉴定

• 作者: 商涛 廖之君 张海燕 郑文岭 陈霞 马文丽 黄吉城
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 克隆载体 亚克隆构建 长片段RT-PCR 西尼罗病毒
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 硕博专栏论著
• 页码范围: 205-208
• 页数: 4页
• 分类号: R373.9
• 字数: 3031字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3619.2008.03.005

摘要

目的 构建西尼罗病毒基因组的cDNA亚克隆,为西尼罗病毒全长cDNA克隆的研发和应用打下基础.方法 根据基因组中限制性酶切位点的分布设计4对引物,QIAamp RNA抽提试剂盒提取西尼罗病毒培养细胞BHK-21的总RNA,长片段RT-PCR技术扩增目的 基因片段.将目的 基因片段与pMD18-T载体进行连接,转化入感受态细胞E.coli DH5α,进行蓝白斑筛选后得到阳性克隆,将重组质粒进行PCR和测序鉴定.结果 获得的目的 基因片段经PCR和测序结果表明西尼罗病毒功能基因正确地克隆进入载体.结论 成功获得西尼罗Ⅰ型病毒功能基因的cDNA亚克隆,可应用于西尼罗病毒全长cDNA克隆的制备.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马文丽	南方医科大学基因工程研究所	275	1255	15.0	23.0
2	廖之君	南方医科大学基因工程研究所	10	33	4.0	5.0
3	张海燕	南方医科大学基因工程研究所	13	59	5.0	7.0
5	陈霞	南方医科大学基因工程研究所	18	62	4.0	7.0
6	黄吉城	广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心	43	38	4.0	5.0
9	商涛	南方医科大学基因工程研究所	7	15	3.0	3.0