纳豆激酶第36位氨基酸突变对其活性及热稳定性的影响

• 作者: 刘朔 姜梅 董明盛 陈刚 陈晓红
• 来源期刊: 南京农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 纳豆激酶 nk基因 序列分析 毕赤酵母 热稳定性
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 页码范围: 130-136
• 页数: 7页
• 分类号: Q78
• 字数: 4215字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-2030.2008.03.026

摘要

为了解纳豆激酶分子结构与其功能的关系,研究了纳豆菌诱变株DU115的纳豆激酶基因突变对其酶活性和热稳定性的影响.从原生质体紫外诱变纳豆菌DU115和野生纳豆菌BN10基因组DNA中扩增纳豆激酶成熟肽基因nkD和nkB,构建重组表达载体pPICZα-A-nkD和pPICZα-A-nkB,在毕赤酵母X-33中实现了表达,并对表达产物进行分离纯化、酶活性测定及热稳定性检测.结果表明,与nkB基因序列相比,nkD基因有两处的核苷酸发生了突变(A107G和C396T),A107G碱基突变导致氨基酸的替代D36G(Asp→Gly);诱变菌株纳豆激酶DNK与野生菌的BNK在65 ℃处理15 min后,前者的热稳定性提高20%,比活力提高16.6%.由此可推断,第36位氨基酸残基的突变可能与其酶热稳定性及活性提高密切相关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董明盛	南京农业大学食品科学技术学院	148	2085	24.0	35.0
2	姜梅	南京农业大学食品科学技术学院	41	512	14.0	20.0
3	陈刚	南京农业大学食品科学技术学院	6	57	3.0	6.0
4	陈晓红	南京农业大学食品科学技术学院	43	541	14.0	20.0
5	刘朔	南京农业大学食品科学技术学院	2	19	2.0	2.0