汉坦病毒SEO型S基因的克隆及在大肠杆菌中的高效表达

• 作者: 张守峰 张秀香 徐慧娟 扈荣良 李修明 王晓虎 袁子国 高胜岩
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 汉坦病毒 SEO型 S基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 111-114
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 3272字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5503.2008.02.008

摘要

目的 构建汉坦病毒SEO型S基因原核表达载体.方法 应用RT-PCR方法扩增汉坦病毒SEO型的YZG-Changchun株S基因,克隆至pMD18-T载体中,经酶切鉴定及PCR分析后,定向克隆入原核表达载体pET-28a中,转化E.coli Rosetta,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分析外源蛋白的表达情况.结果 表达载体经双酶切和测序证明构建正确.IPTG浓度为1.0mm ol/L,诱导4.5h时,S基因在原核细胞中得到了高效表达,表达的蛋白占菌体蛋白总量的37%,纯化后的蛋白具有良好的抗原活性.结论 已成功构建了汉坦病毒SEO型S基因原核表达载体,并得到高效表达.