Tumstatin-EGFP在CHO细胞中的表达和活性分析

• 作者: 姚丽娟 孔建新 濮跃晨 罗以勤 赵亮 马筱玲
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 绿色荧光蛋白质类
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 603-607
• 页数: 5页
• 分类号: R341|R394
• 字数: 4439字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1492.2008.06.003

摘要

目的 分析融合蛋白tumstatin-EGFP在中国仓鼠卵巢细胞(CH0)中的表达及生物学活性.方法 经过酶切和测序正确的真核表达载体PIRESneo3/STL-EGFP、PIRESneo3/sig-EGFP和空载体稳定转染CHO细胞后,用Western blot从细胞上清液中检测融合蛋白的表达、倒置荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达.通过生长曲线分析外源基因的导入对CHO细胞生长的影响,MTT法和管状形成抑制试验评估tumstatin-EGFP融合蛋白的tumstatin样活性,体外靶向试验验证tumstatin能否携带融合蛋白特异性结合内皮细胞.结果 获得了稳定转染的CHO细胞系.生长曲线表明转染后的较未转染的CHO细胞生长缓慢,MTY试验和管状形成抑制试验分别证实了融合蛋白tumstatin-EGFP具有抑制内皮细胞增殖,明显抑制血管管状结构的形成的作用;体外靶向试验也验证了tumstatin-EGFP能够特异性结合内皮细胞.结论 重组真核表达载体在CHO细胞获得稳定表达,融合蛋白tumstatin-EGFP的表达不影响tumstatin和EGFP各自的生物学活性,并且在体外tumstatin能特异性携带:EGFP靶向内皮细胞,为进一步tumstatin及其融合蛋白的研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵亮	安徽医科大学附属省立医院检验科	20	62	5.0	6.0
2	罗以勤	安徽医科大学附属省立医院检验科	27	130	7.0	10.0
3	孔建新	安徽医科大学附属省立医院检验科	14	76	6.0	8.0
4	马筱玲	安徽医科大学附属省立医院检验科	60	443	11.0	18.0
5	濮跃晨	安徽医科大学附属省立医院检验科	10	36	3.0	6.0
6	姚丽娟	安徽医科大学附属省立医院检验科	18	81	6.0	8.0