ASP-ChIFN-α融合基因的构建及表达

• 作者: 周学章 李丽 李敏 王玉炯
• 来源期刊: 宁夏大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 鸡α-干扰素基因 L-天(门)冬酰胺酶Ⅱ信号肽 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 研究专题
• 页码范围: 157-160
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3815字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-2328.2008.02.017

摘要

利用PCR技术从宁夏地方三黄肉鸡肝组织中扩增出α干扰素基因,构建成原核重组表达质粒pET-28a/(ChIFN-α从埃希氏菌属大肠杆菌(Escherichia coli)中扩增出L-天(门)冬酰胺酶Ⅱ(L-Asmraginase,ASP)信号肽基因,并与原核重组质粒pET-28a/ChIFN-α连接,构建成分泌型表达重组质粒pET-28a/ASP-ChIFN-α将重组质粒经IPTG诱导5 h.用SDS-PAGE分析表达蛋白含量,并用鸡α-干扰素ELISA(Western-blot)试剂盒检测表达的重组蛋白的特异性.结果表明,包涵体型重组质粒pET-28a/ChIFN-α和分泌型重组质粒pET-28a/ASP-ChIFN-α在23 kD处均表达出目的蛋白,蛋白含量分别为27%和38%,pET-28a/ASP-ChIFN-α的蛋白表达含量比pET-28a/ChlFN-α的蛋白表达含量要高出11%,表达的重组蛋白具有特异性.实验实现了鸡α-干扰素成熟蛋白基因的高效表达,筛选出了可应用于临床的鸡α-干扰素高效表达菌株BL21(DE3)(pET-28a/ASP-ChIFN-α).

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周学章	宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室	55	89	5.0	7.0
2	李丽	宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室	17	71	3.0	8.0
3	王玉炯	宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室	108	671	13.0	20.0
4	李敏	宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室	48	200	7.0	12.0