脂肪细胞新蛋白My027原核表达、纯化及生物活性研究

• 作者: 刘优萍 李晓华 罗敏 郑升 骆天红
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 蛋白My027 原核表达 生物活性
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 292-295
• 页数: 4页
• 分类号: R589
• 字数: 3325字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2008.04.003

摘要

目的 通过原核表达获得大量脂肪新蛋白质My027,并在体外初步研究其生物活性.方法 RT-PCR法扩增出My027片段,插入原核表达载体pGEx-4T-2,构建质粒pGEX-My027.转化BL-21菌,IPTG低温诱导表达融合蛋白,经亲和层析法获得融合蛋白,利用SDS-PAGE、Western印迹及质谱进行搭定.在还原性谷胱甘肽存在的条件下,将纯化得到的融合蛋白作用于乙二醛酶Ⅰ的底物甲基乙二醛,通过分光光度法榆测产物物乳酸谷胱甘肽的生成.结果 仓融合蛋白以水溶形式分泌于大肠埃希菌BL-21胞浆中,纯化后的目的蛋白 SDS-PAGE、Western印迹及质谱证实高效表达,氨基酸序列正确.结论 表人脂肪细胞新蛋白质My027在pGEX-4T-2原核表达载体中可获高效表达,所纯化蛋白具有类似于乙二醛酶Ⅰ的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	骆天红		8	15	3.0	3.0
3	李晓华	上海交通大学附属第一人民医院内分泌科	19	158	6.0	12.0
4	郑升		2	6	1.0	2.0
10	刘优萍		1	0	0.0	0.0