福氏志贺菌外输调节蛋白基因marA的原核表达载体构建及其鉴定

• 作者: 吴培星 周旭正 张继瑜 李剑勇 李金善 牛建荣 王松泰 魏小娟
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 志贺菌 marA 原核表达
• 年，卷（期）: 2008,（11）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 26-28
• 页数: 3页
• 分类号: S852.612
• 字数: 2169字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2008.11.012

摘要

目的 构建志贺菌外输调节蛋白基因marA的原核表达载体并对其表达的蛋白进行鉴定.方法 采用PCR从志贺菌基因组DNA中扩增得到志贺菌外输调节蛋白基因marA,并将其定向克隆到原核表达载体pET-30a,构建原核表达重组质粒pET-30a-marA,重组子经限制性内切酶分析、PCR及测序鉴定后,转化宿主菌BL21,IPTG诱导表达,产物进行SDS-PAGE电泳、免疫印迹分析鉴定.结果 经鉴定证实原核表达载体pET-30a-marA构建成功,且在大肠杆菌BL21中获得了MarA与His的融合表达,且表达蛋白产物的分子质量大小与预期值一致,并可被特异性抗体所识别.结论 MarA在大肠杆菌中获得了高效的表达,为进一步研究其免疫学特性和功能奠定了基础.