II型登革病毒NS1基因的克隆及其在昆虫细胞中的表达

• 作者: 姚苹苹 徐芳 朱函坪 朱智勇 程胤凯 翁景清 谢荣辉
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 登革病毒 非结构蛋白 克隆 真核表达
• 年，卷（期）: 2008,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1114-1117
• 页数: 4页
• 分类号: R373
• 字数: 2901字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2008.12.008

摘要

目的 获得II型登革热病毒NS1基因并在昆虫细胞中表达,为进一步研发登革热血清学检测试剂盒提供抗原.方法 RT-PCR扩增II型登革热病毒NS1基因并测序列,并定向克隆入杆状病毒转移载体pFastBac-HTA,获得重组转移载体pFastBac-NS1.并将pFastBac-NS1转化到DH10Bac感受态细胞中,筛选到重组转座子rBacmid-NS1.在脂质体介导下将rBacmid-NS1转染Sf9昆虫细胞获得重组杆状病毒rBV-NS1.rBV-NS1感染Sf9细胞后,通过SDS-PAG和Western blot检测NS1重组蛋白.结果 成功克隆II型登革病毒NS1基因,SDS-PAGE、间接免疫荧光和Western blot检测表明NS1基因在昆虫细胞得到表达,能与登革患者血清发生特异性免疫反应,具有免疫原性.结论 II型登革病毒非结构蛋白NS1在昆虫中表达,为进一步研究NS1的生物学特性和血清学检测奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚苹苹	浙江省疾病预防控制中心出血热重点实验室	58	222	9.0	11.0
2	翁景清	浙江省疾病预防控制中心出血热重点实验室	50	254	9.0	13.0
3	徐芳	浙江省疾病预防控制中心出血热重点实验室	30	126	7.0	9.0
4	朱函坪	浙江省疾病预防控制中心出血热重点实验室	41	133	6.0	8.0
5	谢荣辉	浙江省疾病预防控制中心出血热重点实验室	26	130	7.0	10.0
6	程胤凯	浙江省疾病预防控制中心出血热重点实验室	5	6	2.0	2.0