TNFR1BP/IgGFc融合蛋白载体的构建、表达及其生物学活性研究

• 作者: 姜小丹 尹丙姣 曾庆岭 李卓娅 梁慧芳 王晶 黄丽霞
• 来源期刊: 华中科技大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 肿瘤坏死因子-α 真核表达 IgGFc融合蛋白 封闭肽
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 561-564,封2
• 页数: 5页
• 分类号: R730.3
• 字数: 4217字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-0741.2008.05.001

摘要

目的 构建肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)封闭肽与IgGFc融合蛋白的真核表达载体,检测其表达和生物学活性.方法 将合成的TNFR1封闭肽(TNFR1BP)基因片段插入质粒pIG/3C,构建真核表达载体pIG/3C-TNFR1BP;脂质体法将重组载体转染COS-7细胞;ELISA和Western blot法检测转染细胞的培养上清中TNFR1BP/IgGFc融合蛋白的表达;间接免疫荧光抑制实验、细胞毒抑制实验检测融合蛋白对TNFR1的封闭作用.结果 经PCR和核苷酸序列测定证实TNFR1BP基因正确插入质粒pIG/3C.ELISA检测证实,在转染细胞培养上清中有融合蛋白的表达;间接免疫荧光抑制实验和细胞毒抑制实验证实融合蛋白能结合L929细胞表面的TNFR1,并能抑制分泌型肿瘤坏死因子α(sTNF-α)介导的细胞毒作用.结论 成功构建并实现TNFR1BP/IgGFc融合蛋白真核表达;体外实验证实此融合蛋白可通过与细胞表面TNFR1结合,从而拮抗sTNF-α介导的生物学效应.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王晶	华中科技大学同济医学院基础医学院免疫学系	120	509	12.0	16.0
2	梁慧芳	华中科技大学同济医学院基础医学院免疫学系	36	104	5.0	7.0
3	姜小丹	华中科技大学同济医学院基础医学院免疫学系	20	53	4.0	6.0
4	尹丙姣	华中科技大学同济医学院基础医学院免疫学系	18	72	5.0	7.0
5	李卓娅	华中科技大学同济医学院基础医学院免疫学系	55	184	7.0	10.0
6	黄丽霞	华中科技大学同济医学院基础医学院免疫学系	2	0	0.0	0.0
7	曾庆岭	华中科技大学同济医学院基础医学院免疫学系	3	6	2.0	2.0