中介蝮Asn49-PLA2基因原核表达载体的构建及初步表达

• 作者: 侯彬 张侃 张卫柱 张琛 杨章民
• 来源期刊: 陕西师范大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 中介蝮 磷脂酶A2 基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 76-80
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3733字
• 语种: 中文

摘要

以来自中介蝮(G.intermedius)毒腺cDNA文库的3个新Asn49-PLA2基因(GI4-PLA2,GIs-PLA2及其突变体G15'-PLA2)为模板,用PCR及DNA重组技术,将三个PLA2基因克隆到原核表达载体pQE-30,并在宿主茵E.coli Rosseta(DE3)中进行诱导表达.Bam H Ⅰ/Hind Ⅲ双酶切及测序结果提示,成功构建了3个原核表达栽体(pQE-30/GI4-PLA2,pQE-30/GI5-PLA2,pQE-30/GI2'-PLA2).SDS-PAGE结果表明,中介蝮的3个Asn49-PLA2基因在大肠杆茵中实现表达,而且在37℃、1mM IPTG的诱导条件下,GI4-PLA2和GI5-PLA2的最佳表达时间为25h,而GI5'-PLA2在15h有较高水平的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨章民	陕西师范大学生命科学学院	47	201	6.0	12.0
2	张琛	陕西师范大学生命科学学院	9	29	2.0	5.0
3	侯彬	陕西师范大学生命科学学院	1	1	1.0	1.0
4	张卫柱		4	48	2.0	4.0
5	张侃	陕西师范大学生命科学学院	2	1	1.0	1.0