鸡CaBP-D28k基因克隆、序列测定及其真核表达质粒的构建

• 作者: 严桂芹 俞路 周联高 孙怀昌 孙龙生 李治学 李燕舞 王志跃 王雅倩 章世元
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡 CaBP-D28k 基因克隆 真核表达载体
• 年，卷（期）: 2008,（10）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 1329-1335
• 页数: 7页
• 分类号: S835.2
• 字数: 4170字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2008.10.007

摘要

采集200日龄产蛋新扬州鸡小肠组织直接提取总RNA进行反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增,扩增产物进行克隆、测序,获得了新扬州鸡CaBP-D28k基因序列.序列测定表明,CaBP-D28k基因核苷酸长度为789bp,编码262个氨基酸.与GenBank上发表序列(NM_205513.1)比较,核苷酸同源性为99.9%,在760 bp处存在G→T的错义突变.与从GenBank下载的马、人、小家鼠、蟾蜍序列进行比较分析,核苷酸同源性分别为79.3%、79.1%、77.4%、77.3%.将该基因片段克隆到真核表达载体pCEP4,构建重组质粒pCEP4-CaBP-D28k,所获重组质粒经过酶切、测序鉴定,证实含有目的片段,且连接、构建正确,为利用pCEP4-CaBP-D28k调控蛋禽钙代谢、改善蛋壳质量的研究应用奠定了基础.