弓形虫依钙蛋白激酶Calpain-like基因的克隆及表达

• 作者: 付玉才 张仁利 李璐 耿艺介 陈雪艳 高世同 黄达娜
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 弓形虫 Calpain-like基因 基因克隆 蛋白表达
• 年，卷（期）: 2008,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究论著
• 页码范围: 995-998
• 页数: 4页
• 分类号: R382.5
• 字数: 4295字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3619.2008.10.001

摘要

目的 克隆弓形虫RH株Calpain-like基因片段,构建原核表达载体,诱导表达Calpain-like基因重组蛋白.方法 收集、纯化弓形虫RH株速殖子,提取总RNA,在设计合成的引物中引入Sal I和EcoR I酶切位点.应用RT-PCR扩增弓形虫RH株Calpain-like基因片段,插入pGEM-T载体,提取重组质粒,双酶切获得目的基因,亚克隆到原核表达质粒pET32a,重组子经双酶切、PCR和DNA序列分析鉴定,转化大肠杆菌BL21并以IPTG诱导表达.结果 从弓形虫RH株速殖子cDNA中扩增出316 bp的Calpain-like基因片段;含pET32a/Calpain-like的重组质粒在宿主菌经诱导后,获得与预期分子量相符的表达产物.结论 成功地克隆和表达弓形虫RH株Calpain-like基因,弓形虫Calpain-like基因的克隆表达为进一步筛选弓形虫疫苗候选分子和治疗药物的靶位提供了研究基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张仁利		192	798	13.0	17.0
2	耿艺介		105	506	11.0	15.0
3	高世同		137	593	11.0	15.0
4	黄达娜		134	499	10.0	13.0
5	陈雪艳		3	5	1.0	2.0
9	付玉才	汕头大学医学院	5	24	3.0	4.0
10	李璐		2	5	1.0	2.0