人MASP1 N端片段原核表达载体的构建及其表达

• 作者: 左大明 张丽芸 蔡学敏 赵娜 陈政良
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶1 N端片段 原核表达
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 546-549
• 页数: 4页
• 分类号: R392.1
• 字数: 3151字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-8738.2008.06.002

摘要

目的:在大肠杆菌中表达人甘露聚糖结合凝集素(MBL)相关丝氨酸蛋白酶1(MASP1)N端片段.方法:采用PCR技术从含人MASP1 cDNA的质粒pGEM-MASP1中扩增MASP1-N端基因片段,将其插入原核表达载体pGEX4T-1,转化BL21(DE3)感受态菌诱导表达MASP1-N端蛋白,通过GSTrap亲合层析柱纯化目的蛋白,以SDS-PAGE和Westernblot进行鉴定,并以ELISA分析了目的蛋白与重组MBL-CLR、重组MBL的结合活性.结果:从pGEM-MASP1中扩增得到约860 bp的基因片段,构建成重组载体经酶切出现约4 900 bp和860 bp片段,测序结果与预期的完全一致.纯化蛋白经SDS-PAGE可见Mr60000蛋白带,该蛋白可与抗GST抗体反应并能与重组人MBL-CLR、重组人MBL蛋白结合.结论:获得了表达人MASP1 N端片段的大肠杆菌菌株和重组人MASP1 N端片段/GST融合蛋白,为MASP1分子的进一步研究提供了条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张丽芸	南方医科大学免疫学教研室	39	195	8.0	11.0
2	陈政良	南方医科大学免疫学教研室	68	338	10.0	13.0
3	左大明	南方医科大学免疫学教研室	34	114	6.0	9.0
4	赵娜	南方医科大学免疫学教研室	7	41	5.0	6.0
5	蔡学敏	南方医科大学免疫学教研室	5	31	4.0	5.0