GST-gAD在大肠杆菌中的优化表达及其生物活性测定

• 作者: 尹东 王静 罗志军 肖彬
• 来源期刊: 江西医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 脂联素 球状结构域 重组蛋白表达 乳腺癌细胞
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 12-15
• 页数: 4页
• 分类号: R378.2+1
• 字数: 3354字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2294.2008.03.004

摘要

目的 探讨可溶性重组脂联素球状结构域融合蛋白(GST-gAD)在大肠杆菌中的优化表达及其抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的生物学活性.方法 用含有GST-gAD基因的原核表达载体pGEX-KG-gAD转化E.coli JM109,同理空载质粒pGEX-KG作为内对照同时转化E.coli JM109;将影响融合蛋白表达的4个因素,温度、IPTG浓度、细菌密度OD600和诱导时问进行正交设计.确定其优化表达条件,用亲和层析法纯化GST-gAD;用MTT法检测GST-gAD对MDA-MB-231增殖的影响.结果 GST-gAD最佳表达条件为温度32℃,IPTG的浓度1.0 mmol/L,诱导前细菌密度OD6001.0,诱导表达时间1.5 h.GST-gAD浓度高于0.5μmol/L时对MDA-MB231细胞的生长具有明显的抑制作用.结论 通过正交设计确定了可溶性GST-gAD融合蛋白在大肠杆菌中表达的优化条件并且当重组融合蛋白在大于0.5μmol/L时对MDA-MD231细胞的生长具有明显的抑制作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	尹东	南昌大学第二附属医院分子医学重点实验室	11	47	5.0	6.0
2	肖彬	南昌大学第二附属医院分子医学重点实验室	2	2	1.0	1.0