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复合通用CD4+Th细胞表位基因的原核表达及免疫学特性
复合通用CD4+Th细胞表位基因的原核表达及免疫学特性
作者:
刘汉平
方志正
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
CD4+Th细胞表位
原核表达
免疫原性
载体蛋白
摘要:
目的 构建复合通用CD4Th细胞表位基因的原核表达载体,检测表达蛋白的免疫学特性,并探讨其作为载体蛋白的可能性.方法 以限制性核酸内切酶BamH Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切重组质粒pUC19-Pep10,回收长度为650 bp左右的目的 片段.插入原核表达载体pQE30中,获得重组质粒pQE30-Pep10,转化大肠杆菌M15后进行诱导表达.表达产物经SDS-PAGE和Westem blot分析后,进行亲和层析纯化及透析复性,获得重组蛋白Pep10,将Pep10和TT分别免疫雌性BALB/c小鼠,以间接ELISA法和流式细胞术分别检测其免疫原性和淋巴细胞增殖效应.结果 SDS-PAGE显示重组蛋白Pep10相对分子质量约为23 000,表达量达41%,主要以包涵体形式表达,Western blot检测可见特异性染色条带,纯化后纯度达94%,共获得42 mg重组蛋白.其体外淋巴细胞增殖效应与TT相当,增殖指数分别为4.216和4.736,而免疫原性远低于TT,特异性IgG几何平均滴度(GMT)分别为1:15 758.65和1:67 558.81.结论 已成功构建重组原核表达载体pQE30-Pep10,并在大肠杆菌中高效表达,且表达的重组蛋白Pep10具有良好的淋巴细胞增殖效应和较低的免疫原性,有可能作为一种新型载体蛋白,用于多糖结合疫苗的研制.
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内容分析
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文献信息
篇名
复合通用CD4+Th细胞表位基因的原核表达及免疫学特性
来源期刊
中国生物制品学杂志
学科
生物学
关键词
CD4+Th细胞表位
原核表达
免疫原性
载体蛋白
年,卷(期)
2008,(6)
所属期刊栏目
基础研究
研究方向
页码范围
452-456
页数
5页
分类号
Q786
字数
3507字
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1004-5503.2008.06.002
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
方志正
武汉生物制品研究所基因工程室
13
34
3.0
5.0
2
刘汉平
武汉生物制品研究所基因工程室
4
9
2.0
3.0
传播情况
被引次数趋势
(/次)
(/年)
引文网络
引文网络
二级参考文献
(14)
共引文献
(2)
参考文献
(8)
节点文献
引证文献
(1)
同被引文献
(1)
二级引证文献
(6)
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研究主题发展历程
节点文献
CD4+Th细胞表位
原核表达
免疫原性
载体蛋白
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国生物制品学杂志
主办单位:
中华预防医学会
长春生物制品研究所有限责任公司
出版周期:
月刊
ISSN:
1004-5503
CN:
22-1197/Q
开本:
大16开
出版地:
长春市西安大路3456号
邮发代号:
12-128
创刊时间:
1988
语种:
chi
出版文献量(篇)
5980
总下载数(次)
27
总被引数(次)
20856
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