真菌嵌合体植酸酶的构建及其抗蛋白酶水解特性研究

• 作者: 刘世贵 廖玲 贝锦龙 陈庄
• 来源期刊: 中山大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 植酸酶 烟曲霉 黑曲霉 蛋白酶水解 蛋白质工程
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 页码范围: 72-76,87
• 页数: 6页
• 分类号: Q814
• 字数: 4753字
• 语种: 中文

摘要

在烟曲霉植酸酶(Afp)的基因上,通过PCR逐步将编码1-47、178-237及338-381多肽序列的DNA片段置换为黑曲霉NRRL 3135植酸酶(Anp)中的对应片段,构建了3个嵌合体(嵌合体Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ)基因,并在毕赤酵母中将其成功表达及纯化.所有的嵌合体和亲本植酸酶均能抵抗胃蛋白酶.在m(胰蛋白酶)/m(植酸酶)为0.1时,Anp完全失活;但Afp与所有嵌合体的活性仅损失13%～23%.胰蛋白酶水解产物的SDS-PAGE结果显示嵌合体Ⅱ与Ⅲ也能被胰蛋白酶严重水解,但非变性PAGE结果却表明它们在水解后仍能保持结构完整.嵌合体也具有一些与Anp及Afp相异的新pH曲线及耐热性.实验表明,通过替换基因片段改良真菌植酸酶可行.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘世贵	四川大学生命科学学院	115	1963	26.0	37.0
2	陈庄	四川大学生命科学学院	36	336	9.0	17.0
4	贝锦龙	广东省农业科学院畜牧研究所	9	56	5.0	7.0
5	廖玲	广东省农业科学院畜牧研究所	10	222	6.0	10.0