人β防御素4在大肠杆菌中的融合表达及其多克隆抗体的制备和鉴定

• 作者: 张光运 张国成 曹玉红
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 人β防御素4 基因克隆 融合表达
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 抗体工程
• 页码范围: 150-152
• 页数: 3页
• 分类号: Q786
• 字数: 3687字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-8738.2008.02.016

摘要

目的:构建人β防御素4(human β defensin 4,HBD4)基因的原核融合表达载体PGEX-4T-2/mHBD4,诱导GST-HBD4融合蛋白在大肠杆菌中表达,并制备其多克隆抗体.方法:从重组克隆载体PMD18-T/HBD4中扩增HBD4成熟肽编码基因,并克隆入PGEX-4T-2中,在IPTG诱导下,表达GST-HBD4融合蛋白.以表达的融合蛋白GST-HBD4作为免疫原免疫家兔制备抗GST-HBD4的抗血清,抗体效价及特异性分别用ELISA和Western blot法鉴定.结果:在大肠杆菌中成功表达Mr约为32 000的融合蛋白GST-HBD4.ELISA法检测抗血清的效价可达到1:128 000,Western blot分析抗血清可与原核表达的融合蛋白GST-HBD4特异结合.结论:在大肠杆菌中成功表达了GST-HBD4融合蛋白,并制备了GST-HBD4的抗血清,为进一步研究HBD4蛋白的结构和功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张国成	第四军医大学西京医院儿科	131	1065	16.0	25.0
2	曹玉红	第四军医大学西京医院儿科	43	218	9.0	11.0
3	张光运	第四军医大学西京医院神经内科	43	241	9.0	13.0