构建睫状神经营养因子和绿色荧光蛋白基因转导的重组腺病毒载体

• 作者: 刘然义 朱灿胜 胡学强 陆正齐 黄必军 黄文林
• 来源期刊: 中华神经医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 睫状神经营养因子人源性 基因重组 腺病毒载体 基因治疗
• 年，卷（期）: 2008,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1196-1199
• 页数: 4页
• 分类号: Q782
• 字数: 3230字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2008.12.003

摘要

目的 以重组腺病毒(rAd)为载体构建腺病毒-睫状神经营养因子-内部核糖体进入位点-绿色荧光蛋白(Ad-CNTF-IRES-GFP).方法 先构建Psp-CNTF-IRES-GFP质粒,再制备PDC316-CNTF-IRES-GFP质粒,然后在脂质体的作用下,用构建好的PDC316-CNTF-IRES-GFP质粒与骨架质粒PBHG在293-LP细胞中构建Ad-CNTF-IRES-GFP腺病毒,并扩增、纯化,鉴定病毒活性.最后,将Ad-CNTF-IRES-GFP转染人源性骨髓间充质细胞(MSCs),观察MSCs的CNTF表达情况.结果 成功扩增CNTF基因,扩增后的CNTF基因与基因文库序列完全相符;成功制备PDC316-CNTF-IRES-GFP质粒及Ad-CNTF-IRES.GFP腺病毒,测得Ad-CNTF-IRES-GFP腺病毒的病毒活性单位(pfu)为2.3x1011;构建好的Ad-CNTF-IRES-GFP成功转染MSCs,而凡转染后的MSCs表达CNTF的量为未转染MSCs表达量的20倍.结论 本方法能够成功构建Ad-CNTF-IRES-GFP腺病毒载体,而且转染后的MSCs高度表达CNTF.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陆正齐	中山大学附属第三医院神经病学科	133	645	14.0	17.0
2	胡学强	中山大学附属第三医院神经病学科	172	945	16.0	21.0
3	黄必军	中山大学附属肿瘤医院实验研究部	18	91	5.0	9.0
4	刘然义	中山大学附属肿瘤医院实验研究部	28	126	6.0	10.0
5	黄文林	中山大学附属肿瘤医院实验研究部	40	232	8.0	13.0
6	朱灿胜	中山大学附属第三医院神经病学科	15	73	4.0	8.0