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TH和GDNF双基因表达载体的构建及其在MES23.5细胞中的表达
TH和GDNF双基因表达载体的构建及其在MES23.5细胞中的表达
作者:
刘天蔚
谢俊霞
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
帕金森病
基因治疗
酪氨酸羟化酶
胶质细胞源性神经营养因子
摘要:
目的 构建酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)和胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)双基因表达载体并检测其在体外的表达,为帕金森病提供新的治疗措施.方法 采用分子克隆技术,从pWAV2-TH质粒酶切获得人TH基因片段,将其克隆入真核表达质粒载体pIRES的上游,构建出pIRES-TH.PCR法扩增小鼠GDNF基因片段,克隆入pIRES-TH的下游,构建出携带TH和GDNF双基因的重组质粒pIRES-TH-GDNF.用酶切电泳验证重组结果的正确性,测序检测质粒重组后的序列.随后将重组质粒用Lipofectamine2000转染至MES23.5细胞,经G418筛选后,以RT-PCR及免疫荧光法检测TH和GDNF基因在mRNA及蛋白水平的表达.结果 重组质粒酶切后其片段大小与预期结果相同,测序发现基因序列完全正确.转染后MES23.5细胞中TH和GDNF基因的水平明显升高(P<0.05).结论 重组pIRES-TH-GDNF质粒构建成功并能在体外正确表达TH和GDNF基因.
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载体构建
过表达
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突触蛋白类
神经细胞
增殖
基因
内容分析
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引文网络
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文献信息
篇名
TH和GDNF双基因表达载体的构建及其在MES23.5细胞中的表达
来源期刊
第三军医大学学报
学科
医学
关键词
帕金森病
基因治疗
酪氨酸羟化酶
胶质细胞源性神经营养因子
年,卷(期)
2008,(1)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
53-56
页数
4页
分类号
R394-33|R394.3|R742.5
字数
3755字
语种
中文
DOI
10.3321/j.issn:1000-5404.2008.01.015
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
谢俊霞
青岛大学医学院生理学教研室
91
357
12.0
17.0
2
刘天蔚
青岛大学医学院脑血管病研究所
6
14
2.0
3.0
传播情况
被引次数趋势
(/次)
(/年)
引文网络
引文网络
二级参考文献
(39)
共引文献
(15)
参考文献
(15)
节点文献
引证文献
(5)
同被引文献
(2)
二级引证文献
(9)
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引证文献(1)
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2012(1)
引证文献(0)
二级引证文献(1)
2014(4)
引证文献(3)
二级引证文献(1)
2015(4)
引证文献(0)
二级引证文献(4)
研究主题发展历程
节点文献
帕金森病
基因治疗
酪氨酸羟化酶
胶质细胞源性神经营养因子
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
第三军医大学学报
主办单位:
第三军医大学
出版周期:
半月刊
ISSN:
1000-5404
CN:
50-1126/R
开本:
大16开
出版地:
重庆市沙坪坝区高滩岩30号
邮发代号:
78-91
创刊时间:
1979
语种:
chi
出版文献量(篇)
15739
总下载数(次)
28
总被引数(次)
97850
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