结核分支杆菌MPT83蛋白基因在大肠杆菌表达载体中的克隆、表达与鉴定

• 作者: 尤敏 崔尚金 邓小波
• 来源期刊: 现代预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分支杆菌 MPT83基因 原核表达 SDS-PAGE Wostern blotting
• 年，卷（期）: 2008,（18）
• 所属期刊栏目: 实验技术及其应用
• 页码范围: 3594-3596
• 页数: 3页
• 分类号: R738.911
• 字数: 2660字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-8507.2008.18.050

摘要

[目的]从分支杆菌培养物中提取DNA,扩增结核分支杆菌MPT83蛋白基因,并在大肠杆菌中进行表达、克隆和鉴定. [方法]从分支杆菌培养物中提取总DNA,扩增MPT83因并克隆入T载体,将目的基因插入表达载体pET-32a(+)中,转化BL21宿主菌,IPTG诱导表达构建的表达质粒pET-MPT83经PCR和BamHⅠ+HindⅢ双酶切进行鉴定. [结果]经SDS-PAGE分析,在约42 ku处出现新的蛋白条带,5 h后表达量即达到高峰;Western blotting分析表明,融合蛋白能够被分支杆菌阳性血清所识别;纯化的表达蛋白经SDS-PAGE电泳,出现清晰的单一条带.表明MPT83基因原核表达载体构建成功. [结论]结核分支杆菌MPT83蛋白基因在大肠杆菌表达载体中的克隆、表达与鉴定,为结核病的诊断以及亚单位疫苗、核酸疫苗的制备和应用奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔尚金	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所	108	641	12.0	22.0
2	尤敏	黑龙江省医院道外分院防疫科	23	109	5.0	10.0
3	邓小波	黑龙江省医院道外分院防疫科	2	1	1.0	1.0