靶向β-catenin的shRNA真核表达质粒的构建及鉴定

• 作者: 丁永斌 亢健 夏建国 姜红
• 来源期刊: 南京医科大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 胃癌 短发卡RNA β-catenin
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 12-16
• 页数: 5页
• 分类号: Q782
• 语种: 中文

摘要

目的:针对β-连环蛋白(β-catenin)基因的不同部位,构建靶向β-catenin的shRNA真核表达质粒,鉴定并筛选出最佳抑制效率的表达质粒.方法:针对β-catenin基因的不同部位设计3对短发卡RNA(shRNA)的寡核苷酸片段,克隆到真核表达载体pGPU6中,构建靶向β-catenin的shRNA真核表达质粒pGPU6-β-catenin-shRNA-1、2、3.利用脂质体转染人胃癌细胞株AGS,Western blot法检测并筛选最佳抑制效率的shRNA表达质粒.结果:3个靶向β-catenin的shRNA真核表达质粒pGPU6-β-catenin-shRNA-1、2、3经限制性酶切和测序确实基因插入正确,Western blot法证实pGPU6-B-catenin-shRNA-3明显降低细胞内β-catenin蛋白的表达.结论:成功构建了靶向β-catenin的shRNA真核表达质粒pGPU6-β-catenin-shRNA-1、2、3,并筛选出最佳抑制效率的表达质粒,为进一步研究Wnt/β-catenin信号通路在胃癌中的作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	丁永斌	江苏省人民医院/南京医科大学第一附属医院	8	21	2.0	4.0
2	夏建国	江苏省人民医院/南京医科大学第一附属医院	8	37	4.0	6.0
3	姜红	江苏省人民医院/南京医科大学第一附属医院	4	0	0.0	0.0
4	亢健	江苏省人民医院/南京医科大学第一附属医院	1	0	0.0	0.0