人瘦素基因的克隆及原核表达

• 作者: 任利伟 倪黎纲 吴晓伟 孙敏 李碧春 杨海燕 田智泉 陈强
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 生物学
• 关键词: 瘦素 克隆 瘦索基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 畜牧生产
• 页码范围: 49-51
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 2357字
• 语种: 中文

摘要

为了获得大量的、可供试验研究和制作生物反应器的人瘦素蛋白,从人脂肪组织中提取总RNA,用RT-PCR法获得了编码人瘦素(leptin)167个氨基酸残基的cDNA序列,并克隆至载体pMD19-T Simple上进行序列分析.以克隆的人瘦素cDNA为模板,用特异引物扩增瘦素基因,经Eco RI和Bam HJ双酶切,定向插入高效原核细胞表达载体pGEX-6P-1中,构建重组质粒并转化大肠杆菌BL21(DE3),通过IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE检测.结果:用RT-PCR法扩增得到的cDNA片断序列分析显示,克隆的基因序列和GenBank公布的人瘦素基因序列一致;SDS-PAGE分析基因表达产物,在20 ku处有一特异条带,说明重组质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中可表达人瘦素蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	田智泉	扬州大学动物科学与技术学院	10	43	4.0	6.0
2	孙敏	扬州大学动物科学与技术学院	20	129	6.0	11.0
3	杨海燕	扬州大学动物科学与技术学院	10	119	5.0	10.0
4	吴晓伟	扬州大学动物科学与技术学院	9	71	6.0	8.0
5	倪黎纲		6	19	2.0	4.0
6	陈强	扬州大学动物科学与技术学院	6	41	3.0	6.0
7	任利伟	扬州大学动物科学与技术学院	1	2	1.0	1.0