人β-微管蛋白2C蛋白的原核表达与纯化

• 作者: 何泽 徐宁 武慧娟 沈传陆 王丛阳 王露 田田
• 来源期刊: 新乡医学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 人β-微管蛋白2C基因 原核表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 220-224
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 语种: 中文

摘要

目的 构建体外原核表达和纯化人β-微管蛋白2C(TubB2C)蛋白.方法 通过聚合酶链反应(PCR)扩增出人TubB2C基因完整开放读码框架(ORF),并插入pGEX-6P.1载体中构建pGEX-TubB2C重组质粒.经大肠杆菌BL21转化后,用异丙醇-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导谷胱甘肽S转移酶(GST)-TubB2C融合蛋白表达,用免疫印迹(Western blot)分析鉴定表达的GST-TubB2C蛋白,并在非变性条件下利用Glutathione Sepharose 4B纯化GST-TubB2C蛋白.结果 酶切分析和DNA测序表明TubB2C cDNA完整ORF以正确的阅读框架插入pGEX-6P-1载体;聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果显示表达的GST-TubB2C蛋白相对分子量约为78 000,Western blot结果显示该融合蛋白可被抗GST抗体特异性识别.纯化后的GST-TubB2C蛋白纯度约90%.结论 TubB2C蛋白可在体外大量表达和纯化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	田田	东南大学医学院病理生理学教研室	7	25	3.0	4.0
2	徐宁	东南大学医学院病理生理学教研室	32	243	9.0	14.0
3	王露	东南大学医学院病理生理学教研室	8	19	3.0	4.0
4	武慧娟	东南大学医学院病理生理学教研室	3	11	3.0	3.0
5	王丛阳	东南大学医学院病理生理学教研室	3	25	3.0	3.0
6	何泽	东南大学医学院病理生理学教研室	4	11	2.0	3.0
7	沈传陆	东南大学医学院病理生理学教研室	8	32	3.0	5.0