His-GILZ原核表达载体的构建及其表达与纯化

• 作者: 伊娜 王毅飞 莫永炎 蔡德鸿 邢飞跃 陈宏
• 来源期刊: 广东医学
• 学科: 医学
• 关键词: 糖皮质激素诱导亮氨酸拉链蛋白 融合蛋白 原核蛋白 构建 纯化
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 191-193
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 2545字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9448.2009.02.012

摘要

目的 获取糖皮质激素诱导亮氨酸拉链蛋白(GILZ)的His融合蛋白,为下阶段深入研究GILZ的结构、功能及筛取与其相互作用的蛋白打下基础.方法 利用基因工程技术,BarnH I/Xho I酶切真核表达质粒HA-GILZ/PcDNA3获得GILZ cDNA,重组于能表达6个组氨酸残基的原核表达质粒pET-30a中.然后用该亚克隆重组质粒转化大肠杆茵BL21(DE3),用IPTG诱导表达,用Ni2+-NTA柱纯化.结果 亚克隆获得CILZ/pET-30a高效原核表达重组载体,诱导表达的融合蛋白占细菌总蛋白高达40%以上,纯化的蛋白分子量约为24 kD.结论 成功构建His-GILZ融合蛋白原核表达载体,并高效表达、纯化,为进一步研究其结构功能关系和临床应用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蔡德鸿	南方医科大学珠江医院内分泌科	159	1128	17.0	25.0
2	邢飞跃	暨南大学组织移植与免疫中心	65	209	7.0	10.0
3	陈宏	南方医科大学珠江医院内分泌科	130	728	14.0	21.0
4	伊娜	广东省广州市中医院内分泌科	16	77	5.0	8.0
5	莫永炎	南方医科大学病理生理学教研室	5	8	2.0	2.0
6	王毅飞	南方医科大学珠江医院内分泌科	3	5	2.0	2.0