小反刍兽疫病毒H基因的原核表达与鉴定

• 作者: 吴素丽 曾妮 李伟 李刚 贾凤芹 邱文英
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 小反刍兽疫病毒 H基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 病原及分子生物学
• 页码范围: 117-121
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.5
• 字数: 3853字
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank中已发表的小反刍兽疫病毒(PPRV)Nigeria 75/1株的H基因序列,设计上下游引物并添加BamH I酶切位点,以含有小反刍兽疫病毒H基因的Topo-PPRVH质粒为模板进行PCR扩增,扩增产物克隆于pEASY-T载体中,用BamH I单酶切后将目的片段连接到原核表达载体pET-32a(+)中,核酸序列分析证明.成功构建了PPRV H原核表达质粒pET-32a-H.将pET-32a-H重组质粒转化大肠杆茵 BL21(DE3)进行融合表达.经SDS-PAGE电泳,可见H蛋白获得了高效表达,融合蛋白的分子量约为87 Ku,表达产物以包涵体的形式存在,其表达量达到茵体总蛋白的38%,占包涵体蛋白的80%以上.Western blot鉴定表明,所表达的重组蛋白能被抗组氨酸单抗、抗PPRV标准阳性羊血清及抗PPRV疫苗的羊血清所识别,具有良好的免疫原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李刚	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	111	742	14.0	23.0
2	李伟	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	190	2617	29.0	41.0
3	贾凤芹	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	5	7	2.0	2.0
4	曾妮	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	10	67	4.0	8.0
5	邱文英	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	7	58	5.0	7.0
6	吴素丽	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	1	1	1.0	1.0