牛分枝杆菌外膜蛋白基因ompA的原核表达及免疫活性分析

• 作者: 亓英芳 倪洪波 刘思国 刘慧芳 司微 杜艳芬 王春来 赫明雷 黄瑛
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牛分枝杆菌 外膜蛋白ompA 原核表达 纯化 Westernblot
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 细菌
• 页码范围: 43-46
• 页数: 4页
• 分类号: S858.232.618|Q753
• 字数: 2353字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-6422.2009.04.009

摘要

为验证牛分枝杆菌外膜蛋白A是否具有免疫活性,以牛分枝杆菌Vallee Ⅲ株基因组DNA为模板扩增牛分枝杆菌外膜蛋白基因ompA,采用DNA重组技术将此基因片段连于表达载体pGEX6p-1,构建重组质粒pGEX6p-1-ompA,并将其转化到大肠杆菌中BL21(DE3)中,IPTG诱导(终浓度为0.1mmol/L),表达产物进行SDS-PAGE分析.用glutathione sepharose 4B纯化蛋白和Western blot分析该蛋白的免疫学活性.结果表明:pGEX6p-1-ompA以可溶形式表达,蛋白分子量大小为60 kDa,与预计大小相符,纯化的蛋白具有良好的免疫学活性.