酵母双杂交技术筛选人胰腺细胞中HCV 1b NS3结合蛋白基因

• 作者: 张锦前 成军 李国力 李朝品 王琦 胡传翠
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 非结构蛋白3 丙型肝炎病毒 人胰腺cDNA文库 酵母双杂交
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 454-458
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 5421字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2009.05.004

摘要

目的:应用酵母双杂交技术筛选人胰腺cDNA文库中与HCV 1b亚型非结构蛋白NS3相互作用的结合蛋白的编码基因, 为进一步研究HCV影响糖、脂代谢机制奠定实验基础.方法:扩增人胰腺cDNA文库并纯化鉴定, 纯化后的文库质粒转化酵母菌Y187; 构建诱饵质粒PGBKT7-NS3并转化酵母菌AH109, 在色氨酸缺陷型培养基(SD/-Trp)上筛选阳性菌落.应用酵母双杂交系统3将阳性重组AH109菌株与重组酵母菌株Y187进行配合, 在四缺培养基(SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade)和铺有X-α-gal的四缺培养基上进行筛选, 提取蓝色酵母菌落质粒, 电转化大肠埃希菌DH5α后提取质粒测序,对测序结果进行序列比对和分析.结果:成功构建人胰腺cDNA文库和pGBKT7-NS3重组质粒; 将pGBKT7-NS3质粒转化AH109酵母菌株后, 并从人胰腺cDNA文库中筛选出11种与HCV NS3蛋白相结合的蛋白基因.结论:筛选出的与HCV NS3蛋白结合的胰腺蛋白基因中, 部分与2型糖尿病、肝脏脂肪变性密切相关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李朝品	皖南医学院人体寄生虫教研室	235	781	13.0	17.0
2	成军	北京地坛医院传染病研究所	210	843	13.0	20.0
3	王琦	北京地坛医院传染病研究所	29	36	3.0	4.0
4	张锦前	北京地坛医院传染病研究所	20	80	5.0	8.0
5	李国力	北京地坛医院传染病研究所	11	29	2.0	5.0
6	胡传翠	皖南医学院人体寄生虫教研室	2	14	1.0	2.0