赖型钩端螺旋体LipL32-HlyX融合基因真核表达载体的构建及在COS7细胞中融合表达的研究

• 作者: 张会东 张英 钟琪 鲍朗 黄毕
• 来源期刊: 生物医学工程学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 钩端螺旋体 LipL32-HlyX融合基因 真核表达
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 385-389
• 页数: 5页
• 分类号: R377.5
• 语种: 中文

摘要

从赖型钩端螺旋体017株全基因组中通过聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)分别扩增出脂蛋白32(LipL32)和溶血素-X(HlyX)基因,应用重叠延伸PCR技术(Gene splicing by overlap extension PCR,SOE PCR)获得LipL32-HlyX融合基因.以pcDNA3.1为载体,LipL32-HlyX为目的基因,双酶切构建重组质粒.将重组质粒转化大肠杆菌DH5α,经双酶切、PCR及测序鉴定证实重组质粒构建成功.脂质体转染法将构建成功的重组质粒转染COS7细胞,RT-PCR扩增出约2 000 bp的目的基因,Western blotting分析发现在75 KD处出现特异性的阳性条带.结果证实赖型钩端螺旋体LipL32-HlyX融合基因真核表达载体能在哺乳动物细胞中表达,为钩体DNA疫苗的研究和开发奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	鲍朗		84	212	7.0	10.0
2	张会东		42	109	6.0	8.0
3	黄毕		13	11	3.0	3.0
4	钟琪		25	12	2.0	3.0
5	张英		16	54	3.0	7.0