重组牛O型口蹄疫病毒VP1表位疫苗的构建、表达、纯化及免疫活性研究

• 作者: 于永利 张培因 张永胜 房明丽 杨光 王丽颖 王华 金香兰
• 来源期刊: 现代免疫学
• 学科: 医学
• 关键词: 基因工程疫苗 FMDV VP1
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 230-234
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 语种: 中文

摘要

为构建重组牛O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1表位疫苗,并对其免疫学活性进行研究.利用计算机模拟构象的方法筛选出牛O型FMDV VP1表位六聚体重组蛋白的最佳表位组合形式,通过PCR及基因克隆等方法构建含编码该重组蛋白基因的质粒,大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,镍亲和层析法纯化.通过间接ELISA方法初步检测该蛋白免疫豚鼠血清中的抗FMDV抗体水平;再用活病毒FMDV进行细胞中和实验和乳鼠保护实验以检测豚鼠血清中具有保护性的抗FMDV中和性抗体的滴度.结果:构建了一种编码牛O型口蹄疫病毒VPl表位六聚体重组蛋白的质粒,经诱导表达并纯化后得到重组蛋白,命名为"MIP10".ELISA检测结果显示,MIP10蛋白免疫的豚鼠血清中含有高水平的抗牛O型FMDV抗体.细胞中和实验和乳鼠保护实验结果显示,MIP10蛋白免疫的豚鼠血清中含有针对牛O型FMDV的保护性抗体.重组牛O型VI蹄疫病毒VP1表位疫苗MIP10能够在动物体内诱导产生具有保护性的抗牛O型FMDV中和性抗体,有望开发成预防牛O型FMDV感染的新型疫苗.