人脂联素真核表达质粒构建及其在LX-2中的表达

• 作者: 张育先 白启轩 马红 马超
• 来源期刊: 首都医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 脂联素 肝纤维化 人肝星状细胞系
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 肝纤维化基础研究
• 页码范围: 326-330
• 页数: 5页
• 分类号: R575
• 字数: 3856字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-7795.2009.03.015

摘要

目的 构建人全长脂联素真核表达质粒,转染人肝星状细胞系(LX-2),观察其表达及分泌情况,为脂联素在肝纤维化作用的基础及临床研究提供实验数据.方法 提取人脂肪组织mRNA,用RT-PCR扩增出添加酶切位点的人全长脂联素基因片段,双酶切扩增出的目的 基因片段及空载体质粒P7,将酶切后的片段进行连接、转化构建质粒.用FuGENE HD将构建成功的质粒转染LX-2细胞,用免疫荧光观察其转染效率及细胞定位,Western blotting检测脂联素蛋白表达.结果 酶切及测序证实成功构建人全长脂联素真核表达质粒,免疫荧光检测转染效率约为40%,Western blotting检测到30 000处存在目的 蛋白表达,与预期相对分子质量一致.结论 成功构建的人全长脂联素真核表达质粒能有效转染LX-2细胞及表达脂联素蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马红	首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心	92	813	16.0	23.0
2	马超	首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心	12	35	2.0	5.0
3	白启轩	首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心	6	37	4.0	6.0
4	张育先	首都医科大学附属北京友谊医院肝病中心	5	34	3.0	5.0