小鼠精囊自身抗原的原核表达和纯化

• 作者: 李秀丽 汪莉 王玉民 田利源
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 精囊自身抗原 精子获能 原核表达 纯化
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 485-487
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 3411字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2009.04.009

摘要

目的:在原核细胞中表达小鼠精囊自身抗原(SVA),并对表达产物进行鉴定和纯化.方法:提取小鼠附睾组织总RNA.RT-PCR获得SVA的cDNA,设计并合成特异引物序列,进一步扩增出不合信号肽的SVA编码序列,连入原核表达载体pET28a中,经酶切和测序鉴定正确的重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达,Western印迹分析表达产物His-SVA,采用Ni-NTA纯化融合蛋白His-SVA.结果:原核表达获得融合6个组氨酸的SVA,用抗His单克隆抗体进行Western印迹鉴定,检测到相对分子质量约18x103的目的蛋白,与理论值一致;经Ni-NTA纯化获得较高纯度的His-SVA融合蛋白.结论:获得了在大肠杆菌中表达的小鼠附睾蛋白SVA,为后续研究其对小鼠生殖的影响奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汪莉	军事医学科学院生物工程研究所	15	84	4.0	8.0
2	王玉民	军事医学科学院生物工程研究所	32	154	7.0	11.0
3	田利源	军事医学科学院生物工程研究所	12	53	4.0	7.0
4	李秀丽	军事医学科学院生物工程研究所	5	4	1.0	1.0