PTEN基因真核荧光表达载体的构建及其在喉癌细胞株中的表达

• 作者: 姜艳芳 李野 赵明 金春顺 金玲 陈鸥
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 抑癌基因 PTEN基因 基因克隆 基因表达
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 817-820
• 页数: 4页
• 分类号: R734|Q784
• 语种: 中文

摘要

目的:构建人PTEN基因的真核荧光表达载体并在Hep-2喉癌细胞中高效表达,阐明PTEN基因在喉癌细胞株中的抑癌效果并为喉癌的基因治疗奠定基础.方法:从人喉黏膜组织中提取总RNA,经逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)得到PTEN全基因.克隆入PGEM-T easy载体上,经过PCR和酶切鉴定为阳性的克隆,进行测序分析.将所获得的基因定向克隆入Pegfp-C1载体中构建PTEN真核荧光表达载体,并将其转入Hep-2细胞中进行表达,Western blotting检测其表达.结果:反转录PCR扩增后的产物,在约1 400 bp处可观察到特异性条带,序列分析表明与GenBank中的PTEN基因序列相同.PCI-PTEN真核载体转染Hep-2细胞后的Western Blotting表明表达产物与抗人PTEN单克隆抗体有特异性免疫反应.结论:成功构建出PTEN真核荧光表达载体,诱导产生蛋白经检测证实为PTEN蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	金春顺	吉林大学第二医院耳鼻咽喉科	68	232	8.0	10.0
2	姜艳芳	吉林大学第一医院感染症科	59	187	6.0	10.0
3	赵明	吉林大学第二医院耳鼻咽喉科	45	180	8.0	11.0
4	李野	吉林大学第二医院耳鼻咽喉科	51	182	8.0	10.0
5	陈鸥	吉林大学第二医院耳鼻咽喉科	26	58	5.0	6.0
6	金玲	吉林大学中日联谊医院检验科	21	153	6.0	12.0