籼稻姊妹染色单体粘着蛋白OsRad21-i基因的原核表达载体构建与表达

• 作者: 康海岐 杨金水 申国安 程在全
• 来源期刊: 中山大学学报(自然科学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 杂交籼稻 姊妹染色单体粘着蛋白 OsRad21-i 原核表达 载体构建
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 页码范围: 62-66
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3728字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0529-6579.2009.01.013

摘要

以杂交水稻汕优63的根组织cDNA为模板,采用引物设计引入酶切位点和RT-PCR方法,扩增出了籼稻姊妹染色单体粘着基因OsRad21-i (AY318757)开放阅读框(ORF),命名为Eqfr,两端分别带有BamHⅠ和SalⅠ限制性位点.然后克隆到pGEM-T载体,将重组克隆载体pGEM-T-Eqfr与表达载体pQE30分别同时进行BamHⅠ和SalⅠ双酶切,连接酶切后的Eqfr和pQE30,并转化DH5α感受态细胞,获得了DH5α[pQE30-Eqfr]重组克隆.再以其重组质粒转化M15[pREP-4]感受态细胞,筛选出M15[pQE30-Eqfr, pREP-4]重组克隆.通过诱导表达,检测到了相对分子质量约为116 000的重组蛋白表达,在诱导后的1～3 h里表达量较高,之后表达量开始下降.用实验证实了理论推测ORF的正确性,所获得的表达蛋白及其表达体系为下一步的蛋白质实验奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨金水	复旦大学遗传研究所	24	767	12.0	24.0
2	康海岐	中国科学院昆明植物研究所	33	145	6.0	11.0
4	申国安	复旦大学遗传研究所	5	21	3.0	4.0
7	程在全	中国科学院昆明植物研究所	1	2	1.0	1.0