丙型肝炎病毒全基因重组质粒的构建及其转染细胞系的建立

• 作者: 张丽颖 扈荣良 赵志辉
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 丙型肝炎病毒 全基因 真核表达 转染细胞系
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 45-48
• 页数: 4页
• 分类号: R373.2+1|Q782
• 语种: 中文

摘要

目的 构建丙型肝炎病毒(HCV)全基因重组质粒,并建立其转染细胞系.方法 双酶切质粒JFH1,回收HCV DNA,分别与真核表达载体pIRESneo和逆转录病毒载体pLNCX连接,构建重组质粒pIRESneo-HCV和pLNCX-HCV.将重组质粒pIRESneo-HCV转染BHK细胞,pLNCX-HCV转染pA317细胞.通过PCR、间接ELISA和免疫荧光试验鉴定转染细胞.结果 重组质粒PCR和酶切鉴定证明构建正确.转染细胞上清经PCR检测均可见目的 基因条带;ELISA结果表明,转染细胞冻融上清均可与抗HCV小鼠血清发生强的结合反应;转染细胞均可与抗HCV小鼠血清反应,产生荧光,但荧光不多且斑点不亮.结论 已成功构建HCV全基因重组质粒,并建立了可表达HCV蛋白的转染细胞系,为转基因动物模型的建立奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵志辉	吉林大学畜牧兽医学院	126	506	10.0	17.0
2	扈荣良	军事医学科学院军事兽医研究所	92	445	11.0	15.0
3	张丽颖	吉林大学畜牧兽医学院	13	28	4.0	5.0