幽门螺杆菌hp1188基因的克隆及高效表达

• 作者: 向瑜 杨致邦 范贵荣 郭丽媛 韩飞
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 hp1188基因 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 18-21
• 页数: 4页
• 分类号: R378|Q785|Q786
• 语种: 中文

摘要

目的 克隆并表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)hp1188基因,为研究幽门螺杆菌的黏附机制奠定基础.方法 用PCR法从H,pylori标准株NCTC 11637基因组DNA中扩增hp1188基因,克隆入原核表达载体pQE-30,构建重组原核表达质粒pQE30-hp1188,转化大肠杆菌DH5α,IPTG诱导表达.SDS-PAGE分析表达形式和表达量.表达蛋白经Ni2+-NTA树脂纯化,Western blot鉴定其反应原性.结果 所构建的重组表达质粒pQE30-hp1188序列完整,插入的基因片段全长810 bp,与GenBank中的hp1188基因同源性达98%.表达的重组蛋白相对分子质量约为30 600,以1.0 mmol/L IPTG诱导4 h,表达量最高,破菌上清和沉淀中均有表达,可溶性蛋白表达量占全菌总蛋白的47%.重组蛋白纯化后纯度可达90%,并可被H.pylori 患者血清识别.结论 已成功克隆了H. pylori hp1188基因,并在大肠杆菌DH5α中获得高效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨致邦	重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室	119	522	12.0	17.0
2	向瑜	重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室	22	112	6.0	10.0
3	范贵荣	重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室	3	4	1.0	2.0
4	郭丽媛	重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室	4	0	0.0	0.0
5	韩飞	重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室	3	3	1.0	1.0