LyGDI真核表达载体构建及稳定转染A549细胞株的建立

• 作者: 吴纪霞 周新文 曹丽丽 王兴丹 董玉金 韩琴芳
• 来源期刊: 苏州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: LyGDI 真核表达载体 稳定转染
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 方法与技术
• 页码范围: 108-111
• 页数: 4页
• 分类号: R34
• 语种: 中文

摘要

目的 构建Rho蛋白鸟苷解离抑制因子(LyGDI)真核表达载体并建立稳定转染A549细胞株.方法 PCR扩增LyGDI基因片段,构建pEGFP-C1-LyGDI真核表达载体,经酶切、PCR、测序验证其正确性.脂质体法转染真核细胞A549,G418筛选建立稳定转染的细胞株,RT-PCR、免疫印迹检测稳定转染的细胞株.结果 构建了真核表达载体并建立了稳定转染的A549细胞株,成功表达LyGDI蛋白.结论 LyGDI真核表达载体成功构建及稳定转染A549细胞株的建立,为研究LyGDI过度表达对肿瘤侵袭性和转移的影响奠定了实验基础.