小反刍兽疫病毒F蛋白抗原位点的克隆与表达

• 作者: 吴树清 宋厚辉 王志亮 田晓灵 赵永刚
• 来源期刊: 中国动物检疫
• 学科: 农学
• 关键词: 小反刍兽疫病毒 F基因 原核表达 抗原位点
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 23-25
• 页数: 3页
• 分类号: S852.659.5
• 字数: 2791字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-944X.2009.07.015

摘要

目的表达小反刍兽疫F蛋白的抗原位点用于检测与预防.方法用DNAstar分析小反刍兽疫的抗原位点,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从病羊组织中PPRV的F基因的抗原位点并克隆到原核表达载体PET-28b中,最后用PCR、酶切和测序分析对重组质粒进行鉴定;将重组质粒转化到大肠杆茵Rosetta中,经ITPG诱导表达PPRV F基因的抗原位点;用SDS-PAGE和Western-Blotting分析抗原位点蛋白的表达.结果将RT-PCR产物电泳,得到与预期大小相符的特异性片段;对重组质粒PET-28b-F35-111(pZLW013)、PET-28b-F143-485(pZLW014)和PET-28b-F323-485(pZLW015)酶切后,均出现与预期相符的片段;DNA测序表明插入的片段的序列与小反刍兽疫F基因的抗原位点序列分别完全一致,其大小分别为251bp、1053bp和514bp;将重组表达的蛋白经SDS-PAGE和Western-Blotting分析,证明小反刍兽疫抗原位点F35-111没有表达、抗原位点F143-485和F323-485得到表达.结论成功表达了PPRV F基因的两段抗原位点蛋白,为日后检测与预防工作奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴树清	内蒙古农业大学动物医学与科学学院	73	189	7.0	10.0
2	王志亮		134	936	18.0	25.0
3	赵永刚		34	155	7.0	11.0
4	田晓灵		3	6	2.0	2.0
8	宋厚辉		1	0	0.0	0.0