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小反刍兽疫病毒甘肃株F基因的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备
小反刍兽疫病毒甘肃株F基因的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备
作者:
包世俊
常惠芸
肖敏
薛慧文
邢小勇
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
小反刍兽疫病毒(PPRV)
F基因
克隆
原核表达
免疫原性
摘要:
小反刍兽疫(peste des petits ruminants,PPR)是由副黏病毒科(Paramyxoviridae)麻疹病毒属(Morbillivirus)的小反刍兽疫病毒(Peste des petits ruminants virus,PPRV)引起绵羊(Ovis aries)和山羊(Capra hircus)等小反刍兽的一种急性和高度传染性病毒性疾病,由于其高死亡率常造成绵羊和山羊养殖业的重大经济损失.为研究小反刍兽疫病毒甘肃(GS)株融合蛋白(fusion protein)基因序列特征及其免疫原性,参照GenBank中PPRV Nigeria 75/1株F基因序列(GenBank登录号:HQ197753)设计引物,应用RT-PCR扩增PPRV GS株F基因,在测序及序列分析的基础上,设计引物扩增去信号肽和跨膜区的F基因片段Fa并将其亚克隆至原核表达载体pET-32a(+).重组质粒pET-PPRV-Fa转化大肠杆菌表达菌(Escherichia coli)Transetta(DE3)后经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导表达,表达产物纯化后免疫新西兰兔(Oryctolagus cuniculus)制备多克隆抗体,进而应用间接酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和Western blot对重组蛋白免疫原性进行分析.结果表明,PPRV GS株F基因(GenBank登录号:KX822738)完整CDS全长1 641 bp,编码546个氨基酸.去信号肽和跨膜区的F基因片段Fa在大肠杆菌中成功获得表达,重组蛋白大小约为59 kD,且主要以包涵体形式存在;间接ELISA和Western blot结果表明,纯化产物免疫原性良好.研究结果为F蛋白的相关功能研究及小反刍兽疫的快速诊断方法的建立提供了理论依据.
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IMP1基因
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多克隆抗体
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内容分析
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文献信息
篇名
小反刍兽疫病毒甘肃株F基因的克隆、原核表达及多克隆抗体的制备
来源期刊
农业生物技术学报
学科
农学
关键词
小反刍兽疫病毒(PPRV)
F基因
克隆
原核表达
免疫原性
年,卷(期)
2017,(3)
所属期刊栏目
研究论文与报告
研究方向
页码范围
477-484
页数
8页
分类号
S855.3
字数
语种
中文
DOI
10.3969/j.issn.1674-7968.2017.03.015
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
常惠芸
中国农业科学院兰州兽医研究所
49
411
12.0
18.0
2
薛慧文
甘肃农业大学动物医学院
45
105
5.0
7.0
3
邢小勇
甘肃农业大学动物医学院
42
49
4.0
4.0
4
包世俊
甘肃农业大学动物医学院
43
52
4.0
5.0
5
肖敏
甘肃农业大学动物医学院
5
15
2.0
3.0
传播情况
被引次数趋势
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引文网络
引文网络
二级参考文献
(23)
共引文献
(143)
参考文献
(15)
节点文献
引证文献
(4)
同被引文献
(16)
二级引证文献
(0)
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参考文献(0)
二级参考文献(1)
1986(1)
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1988(1)
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二级引证文献(0)
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节点文献
小反刍兽疫病毒(PPRV)
F基因
克隆
原核表达
免疫原性
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
农业生物技术学报
主办单位:
中国农业大学
中国农业生物技术学会
出版周期:
月刊
ISSN:
1674-7968
CN:
11-3342/S
开本:
大16开
出版地:
北京海淀区圆明园西路2号中国农业大学生命科学楼1053室
邮发代号:
2-367
创刊时间:
1993
语种:
chi
出版文献量(篇)
4211
总下载数(次)
8
总被引数(次)
40364
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:
the National Natural Science Foundation of China
官方网址:
http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:
青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:
数理科学
期刊文献
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