p21 RNAi的pSUPER载体的构建及功能鉴定

• 作者: 姜妙娜 李淑艳 贾弘禔 贾玉红 马天舒
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: p21 pSUPER RNAi 神经元 载体
• 年，卷（期）: 2009,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2243-2245,2309
• 页数: 4页
• 分类号: Q784
• 语种: 中文

摘要

目的:构建抑制p21基因表达的pSUPER RNAi载体(pSUPER-p21)并鉴定其功能.方法:化学合成一对编码短发夹RNA序列的、靶向大鼠p21基因的寡核苷酸链,各60个碱基,退火,克隆到经Bg1 Ⅱ、HindⅢ双酶切的pSUPER质粒上,构建重组RNAi质粒(pSUPER-p21).通过双酶切鉴定及测序分析验证构建效果.将正确构建的质粒转染大鼠原代培养皮质神经元,western blotting检测经红藻氨酸处理的神经元中p21蛋白表达.结果:pSUPER-p21载体经双酶切鉴定及测序分析,结果表明60个碱基成功插入到预计位点,并且序列完全一致.Western blotting结果证实pSUPER-p21载体可特异性抑制红藻氨酸诱导的原代培养皮质神经元中p21蛋白表达的上调.结论:靶向p21的pSUPER RNAi载体构建成功,该载体可特异性抑制p21基因表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姜妙娜	大连医科大学病理生理学教研室	90	553	12.0	16.0
2	马天舒		22	293	10.0	17.0
3	贾玉红	大连医科大学病理生理学教研室	18	91	6.0	8.0
4	贾弘禔	北京大学医学部生物化学与分子生物学系	24	171	6.0	12.0
5	李淑艳	北京大学医学部生物化学与分子生物学系	14	16	3.0	3.0