人脂联素真核表达载体的构建及其表达

• 作者: 周静 姜政 孙伟 王丕龙 陶小红 黄爱龙
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 脂联素 基因克隆 基因治疗 转染
• 年，卷（期）: 2009,（14）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 1413-1414
• 页数: 2页
• 分类号: R394-33
• 字数: 2978字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2009.14.027

摘要

目的 构建人脂联素的真核表达载体,并检测其融合蛋白在真核细胞COS-7中的表达.方法 从人脂肪组织中提取总RNA,通过RT-PCR方法 获得人脂联素基因,将其克隆到真核荧光表达载体pEGFP-N1上,构建重组质粒pEGFP-N1-AdipoQ,转染至真核表达细胞COS-7中,并通过SDS-PAGE和Western blot检测融合蛋白在真核细胞中的表达.结果 通过RT-PCR方法 克隆人脂联素基因744 bp,测序结果 显示,1个碱基发生突变,654位:A→T,突变率为0.%,氨基酸Glu→Asp.通过SDS-PAGE和Western blot检测融合蛋白分子质量约为55×103(绿色荧光蛋白分子质量约为27×103),说明脂联素基因在真核细胞中表达并与绿色荧光蛋白融合.结论 成功的构建了真核表达载体,并在真核细胞中表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王丕龙	重庆医科大学附属第一医院消化内科	151	971	16.0	24.0
2	黄爱龙	重庆医科大学肝炎研究所	236	1190	16.0	23.0
3	陶小红	重庆医科大学附属第一医院消化内科	82	426	11.0	16.0
4	姜政	重庆医科大学附属第一医院消化内科	117	472	10.0	15.0
5	周静	重庆医科大学附属第一医院消化内科	34	100	6.0	9.0
6	孙伟	第三军医大学西南医院全军感染病研究所	7	32	3.0	5.0