人泛素偶联酶UBE2C/UbcH10基因的克隆、原核表达载体的构建及表达

• 作者: 李明 杜红延 王穗海 马奎 黄湘
• 来源期刊: 广东医学
• 学科: 医学
• 关键词: 泛素偶联酶 原核表达载体 构建 表达
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 698-700
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 2267字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9448.2009.05.012

摘要

目的 获取泛素偶联酶家族成员之一的UBE2C/UbcH10的基因,构建具有His标签的原核表达载体,在大肠杆菌中表达UBE2C/UbcH10蛋白.方法 利用RT-PCR的方法 从肝癌细胞HepG2中获得UbcH10的基因,克隆到pMD-19T载体中并测序鉴定,酶切回收后插入原核表达载体pET32a(+)中,构建重组表达载体pET32a-UbcH10,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达.结果 重组表达载体pET32a-UbcH10在大肠杆菌BL21中经IPTG诱导4h获得稳定高效的融合表达.重组蛋白以可溶形式存在,大小在29.0 kD左右.结论 UbcH10重组表达载体的成功构建以及重组蛋白的表达,为进一步其结构和功能的研究奠定了基础,有望揭示该蛋白在癌症发生发展过程中的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李明	南方医科大学生物技术学院抗体工程研究所	212	862	14.0	18.0
2	王穗海	南方医科大学生物技术学院抗体工程研究所	33	92	5.0	7.0
3	杜红延	南方医科大学生物技术学院抗体工程研究所	35	97	5.0	8.0
4	黄湘	南方医科大学生物技术学院抗体工程研究所	59	175	7.0	9.0
5	马奎	南方医科大学生物技术学院抗体工程研究所	2	2	1.0	1.0