真核表达质粒pcDNA3.1(+)-rmCGβ的构建和鉴定

• 作者: 于继云 夏立平 汪良 许铁峰 阎瑾琦 陈兴
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: 恒河猴绒毛膜促性腺激素β亚基 质粒 真核表达 肿瘤疫苗
• 年，卷（期）: 2009,（13）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1588-1590,1593
• 页数: 4页
• 分类号: R730.21
• 字数: 3534字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2009.13.015

摘要

目的 构建恒河猴绒毛膜促性腺激素β亚基(macaca mulatta chorionic gonadotrophin β subunit,rmCGβ)基因真核表达质粒pcDNA3.1(+)-rmCGβ,并了解该质粒能否在真核细胞中表达.方法 通过PCR扩增rmCGβ的全段基因cDNA,应用基因工程技术将扩增的cDNA克隆至PGM-Teasy,测序后插入pcDNA3.1(+)真核表达质粒,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-rmCGβ,经限制内切酶酶切分析及测序鉴定正确后,用脂质体转染技术转染B16细胞,通过RT-PCR扩增出B16/pcDNA3.1(+)-rmCGβ细胞株中rmCGβ全段基因cDNA.结果 经4轮PCR,成功扩增出rmCGβ的cDNA全长基因,酶切和测序证明正确构建了真核表达质粒pcDNA3.1(+)-rmCGβ,通过RT-PCR方法 证实该质粒能在B16真核细胞中正确表达.建立了稳定的细胞株B16/pcDNA3.1(+)-rmCGβ.结论 成功克隆和构建了rmCGβ的真核表达质粒载体pcDNA3.1(+)-rmCGβ,为进一步研究rmCGβ的新功能和免疫治疗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	夏立平	海南医学院肿瘤研究所附属医院肿瘤外科	54	245	8.0	14.0
2	许铁峰	海南医学院肿瘤研究所附属医院肿瘤外科	11	13	1.0	3.0
6	汪良	苏州大学附属第一医院普通外科	65	145	7.0	8.0
7	陈兴	军事医学科学院基础医学研究所疫苗工程研究室	11	32	4.0	5.0
8	阎瑾琦	军事医学科学院基础医学研究所疫苗工程研究室	25	54	4.0	5.0
9	于继云	军事医学科学院基础医学研究所疫苗工程研究室	59	145	6.0	9.0