C型口蹄疫病毒型特异性抗原的表达与鉴定

• 作者: 丛国正 宋帅 常惠芸 林彤 独军政 谢庆阁 邵军军 高闪电
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: C型口蹄疫病毒 血清学 交叉反应 血清分型
• 年，卷（期）: 2009,（35）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 17520-17522
• 页数: 3页
• 分类号: S821.2
• 字数: 2368字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2009.35.045

摘要

[目的]为C型FMDV型特异性多克隆抗体、单克隆抗体的制备及FMDV定型提供理论依据.[方法]以含有C型口蹄疫病毒(FMDV)结构蛋白基因VP1的重组质粒pGEM-CP1为模板,设计特异性表达引物,扩增VP1及其C端编码区.对C型口蹄疫病毒VP1及其C端进行原核表达,并测定反应原性.利用纯化的C型VP1及其C端融合蛋白建立间接ELISA,分别对O、A、C、Asia 1 4型豚鼠阳性血清进行检测,确定C型VP1及其C端与其他3型FMDV抗体的型间交叉反应性.[结果]构建了pP_(RO)-CVP1、pP_(RO)-CVP1c重组原核表达质粒,实现了C型口蹄疫病毒VP1及其C端的高效表达,目的蛋白的分子量大小分别为33和20 kD.Western blot显示,VP1及其C端融合蛋白均可与对应血清型的豚鼠阳性血清反应.C型VP1及其C端与其他血清型的FMDV阳性血清均未发生交叉反应,且以VP1 C端的型特异性最好.[结论]获得了C型FMDV特异性抗原.