大鼠Akt1基因真核表达载体构建及其在293细胞中的表达

• 作者: 宋纯 张睿 王辉
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: AKT1 真核表达载体 293细胞 组织构建
• 年，卷（期）: 2009,（15）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 2991-2994
• 页数: 4页
• 分类号: R349.83
• 字数: 799字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2009.15.041

摘要

背景:Akt在细胞存活、细胞增殖、细胞代谢和细胞凋亡等活动中扮演着重要角色.虽然Akt的作用机制目前尚有很多的未知领域,但其作为生存信号的一个重要组件,已成为近年分子生物研究中的一个重要课题.目的:构建Akt1基因真核表达载体pDC316-Akt1,观察其在293细胞(人胚肾母细胞)中的表达.设计、时间及地点:观察性实验,于2006-09/12在解放军军事医学科学院分子生物实验室完成.材料:pDC316质粒,由本元正阳公司提供;DH5 α、293细胞为自备.方法:采用反转录-聚合酶链反应方法自大鼠肝组织总RNA中克隆AktlDNA片段,测序鉴定正确后,插入真核表达载体pDC316的EcoR Ⅰ、Hind m的酶切位点,构建Akt1真核表达载体Akt-pDC316,脂质体介导法转染293细胞.主要观察指标:蛋白免疫印迹检测转染293细胞中Akt1的表达.结果:经测序鉴定,构建的Akt1氨基酸序列与野生型Akt1序列完全相符.将Akt-pDC316转入293细胞,蛋白免疫印迹检测可见相对分子质量55 000位置有Akt1的表达.结论:构建Akt1基因真核表达载体在293细胞中可以充分的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王辉	辽宁省肿瘤医院大肠外科	50	225	9.0	13.0
2	宋纯	辽宁省肿瘤医院大肠外科	47	238	10.0	13.0
3	张睿	辽宁省肿瘤医院大肠外科	19	36	3.0	5.0