GST-Dot4融合蛋白的表达·纯化及鉴定

• 作者: 丛文娟 刘中来 张艳梅 郭建军
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 融合蛋白 可溶性表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2009,（26）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 12414-12417
• 页数: 4页
• 分类号: S188
• 字数: 4500字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2009.26.024

摘要

[目的]为了提高Dot4蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达并获得较高纯度的蛋白.[方法]以pGEX-KG-Dot4重组质粒转化E. coli BL21 后,用IPTG诱导重组菌表达GST-Dot4融合蛋白,采用SDS-PAGE 及Western Blot法鉴定表达产物,用Glutathione Sepharose4B亲和层析柱分离纯化.[结果]pGEX-KG-Dot4重组表达载体在大肠杆菌中获得高效表达;经Glutathione Sepharose4B亲和层析柱纯化获得了高纯度的Dot4 融合蛋白;Western Blot 表明,该蛋白可与GST 标签抗体反应,表明获得了目的蛋白.[结论]在大肠杆菌中表达纯化后得到较高纯度的GST-Dot4融合蛋白,为Dot4蛋白的结构、功能及作用机制研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭建军	华中师范大学生命科学学院	7	26	2.0	5.0
2	刘中来	华中师范大学生命科学学院	23	348	9.0	18.0
3	丛文娟	华中师范大学生命科学学院	2	1	1.0	1.0
4	张艳梅	华中师范大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0